DNase I, RNase-Free, HC

貨號/規格：E1018-A/1,000 U 

濃度：50 U/μL

產品簡介 

DNase I（無 RNase）是一種可酶切單鏈和雙鏈 DNA 的核酸內切酶。它水解磷酸二酯鍵，產生帶有 5'-磷酸基團和 3'-OH 基團的單脫氧核糖核苷酸和寡脫氧核糖核苷酸。

該酶的活性嚴格依賴于 Ca²⁺，由 Mg²⁺ 或 Mn²⁺ 離子活化。

在 Mg²⁺ 存在時，DNase I 以統計意義上隨機的方式獨立切割 dsDNA 各鏈。Mn²⁺ 存在時，該酶幾乎在同一位點切割兩條 DNA 鏈，產生帶有平末端或僅一或兩個核甘酸的突出端的 DNA 片段。

產品組成

儲存條件

保存于-20°C。

來源

重組 E. coli 菌株，含有編碼牛 DNase I 的克隆基因。

單位定義

一個單位是指在37°C下1分鐘內完全降解 1 μg質粒 DNA所需的酶量。

在以下混合物中測定酶活性：

10 mM Tris-HCl（25°C 時 pH 7.5）、2.5 mM MgCl ₂、0.1 mM CaCl ₂、1 μg pUC19 DNA。一個 DNase I 單位相當于 0.3 Kunitz 單位。

特點

? 重組酶

? 從非動物宿主純化而來，內源性 RNase 水平較低

適用范圍 

? 制備不含 DNA 的 RNA

? 體外轉錄后去除模板 DNA

? 在進行 RT-PCR 和 RT-qPCR 之前制備無 DNA 的 RNA

? 與 DNA 聚合酶 I 配合，通過缺口平移進行 DNA 標記

? 采用 DNase I（無 RNase）足跡法進行 DNA-蛋白相互作用研究

? 生成隨機重疊 DNA 插入片段文庫。使用含有 Mn²⁺ 的反應緩沖液