T4 DNA Ligase
貨號/規格:E1014-A/200 Weiss U; E1014-B/1,000 Weiss U; E1014-C/5,000 Weiss U
濃度:5 Weiss U/μL
產品簡介
T4 DNA Ligase催化雙鏈 DNA 或 RNA 中并列的 5'-磷酸和 3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。該酶可修復雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的單鏈缺口,將 DNA 片段與粘性末端或平末端連接結合,但對單鏈核酸無活性。
T4 DNA 連接酶需要 ATP 作為輔因子。
產品組成
組分 | E1014-A | E1014-B | E1014-C |
T4 DNA Ligase (5 Weiss U/μL) | 40 μL | 200 μL | 200 μL × 5 |
10X T4 DNA Ligase Buffer | 0.5 mL | 1.5 mL | 1.5 mL × 5 |
50% PEG | 0.3 mL | 1.5 mL | 1.5 mL × 5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli 菌株,含有從噬菌體 T4 克隆的基因 30。
單位定義
1個 Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化為可吸附形式所需的酶量。在以下混合物中測定酶活性:
66 mM Tris-HCl (pH 7.6)、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個 Weiss 單位相當于大約 200 個粘性末端連接單位(CEU)。1個CEU是指在特定條件下(即在16°C下30分鐘內),將λ(lambda)DNA的HindIII片段連接達到50%所需的酶量。
適用范圍
? 克隆限制性內切酶生成的 DNA 片段
? 克隆 PCR 產物
? 將雙鏈寡核苷酸連接子或接頭與 DNA 相連
? 定點突變
? 擴增片段長度多態性 (AFLP)
? 連接酶介導的 RNA 檢測
? 雙螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的缺口修復
? 線性 DNA 的自環化