PowerScript RT SuperMix
貨號/規(guī)格:R1081/100 rxns, R1082/500 rxns, R1083/2500 rxns
產(chǎn)品說明
PowerScript RT SuperMix是一種優(yōu)化的5X逆轉(zhuǎn)錄混合物,包含兩步法RT- qPCR工作流程中第一鏈cDNA合成所需的所有成分。它含有耐熱性逆轉(zhuǎn)錄酶,支持在高溫下的cDNA合成。同時含有鼠源RNase抑制劑保護(hù)模板RNA不被降解。混合物中包含的隨機(jī)六聚體和Oligo dT引物,可以充分進(jìn)行各類RNA的逆轉(zhuǎn)錄。本品可對低至單拷貝的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)生的cDNA產(chǎn)物是qPCR檢測的理想模板,保證檢測的靈敏和準(zhǔn)確。
產(chǎn)品組分
組分 | R1081(100 rxns) | R1082(500 rxns) | R1083(2500 rxns) |
PowerScript RT SuperMix | 400 μL | 400 μL×5 | 10 mL |
保存條件
-20℃保存,有效期2年。
適用范圍
第一鏈cDNA 合成
注意事項
l 成功的cDNA合成來自高質(zhì)量的RNA。高質(zhì)量的RNA至少應(yīng)保證全長的完整性并且不含逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制劑,如EDTA或 SDS。
l 檢測所需的RNA量取決于感興趣轉(zhuǎn)錄物的豐度。一般情況下,建議總RNA為1 ng ~ 1 μg或mRNA 0.1 ng ~ 100 μg。
l 在操作過程中,注意防止引入RNase導(dǎo)致RNA降解。RNA最好保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
l 基因組DNA或過量產(chǎn)品的存在會干擾目標(biāo)RNA的準(zhǔn)確定量,特別是對于低拷貝目標(biāo)。無RT對照反應(yīng)可以通過將PowerScript RT SuperMix在95℃下熱失活1分鐘再添加模板RNA來模擬無逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng);此外,應(yīng)設(shè)置NTC(無模板對照)反應(yīng),以證明逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)是有意義的。
l cDNA產(chǎn)物應(yīng)置于-20℃或以下保存,避免反復(fù)凍融。