48小時工作臺穩(wěn)定性,實現高通量處理和操作便利
東盛PCR Mix預混液經過精心設計,可在預組裝反應中保持長達48小時的高水平性能。這種混合物的穩(wěn)定性為高通量液體處理系統的用戶提供了保證,即第一塊板上的結果將與最后一塊板上的結果相似。
對于那些對通量需求不太高的人來說,這種預混液的增強穩(wěn)定性為您的工作流程提供了整體上的便利,因為您不再局限于在冰盒上組裝后立即運行孔板,用戶能夠自信和靈活地在眾多工作流程場景中使用。
東盛生物能實現工作臺穩(wěn)定的PCR Master Mix
應用場景 | 產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格* |
染料法qPCR | SYBR Green qPCR Mix | P2091/P2092 | 1 ml/1 ml×5 |
探針法多重qPCR | Multiplex Probe qPCR Mix Plus U | P2701/P2702 | 1 ml/1 ml×5 |
數字PCR | Super Probe ddPCR Mix | P2901/P2902 | 1 ml/1 ml×5 |
高靈敏NGS PCR | DSPath NGS Multiplex PCR Master Mix II | K031-A/K031-B | 80 rnxs/400 rnxs |
NGS PCR富集 | NGS Multiplex PCR Master Mix II | NM2001/NM2002 | 40 rnxs/400 rnxs |
SYBR Green qPCR Mix
工作臺穩(wěn)定性測試
以生菜RNA為模板逆轉錄生成cDNA,并稀釋至10ng/μl, 1ng/μl, 0.1ng/μl, 0.01ng/μl,4個梯度。通過SYBR Green qPCR Mix進行EIF2A基因檢測。表1展示了各個濃度梯度下0 hr和48 hr的Ct值,以及Ct值的差值。可以看出,預裝配體系室溫放置48小時后SYBR Green qPCR Mix依然具有優(yōu)秀的擴增表現。
表1
cDNA濃度 (ng/μl) | Ct Value 0 hr 48hr | △Ct48hr-0hr | |
10 | 25.26 | 25.01 | -0.25 |
1 | 28.12 | 28.37 | 0.25 |
0.1 | 30.77 | 30.81 | 0.04 |
0.01 | 32.01 | 31.96 | -0.05 |
Multiplex Probe qPCR Mix Plus U
工作臺穩(wěn)定性測試
以人基因組DNA(0.1ng/μl)為模板,通過Multiplex Probe qPCR Mix Plus U進行基因檢測。圖1、圖2分別是在反應體系配制完成后(0 hr)和室溫(25℃)放置48小時后(48 hr)進行檢測的擴增曲線;同時與廠家T同類產品進行對比測試,圖3、圖4分別是廠家T裝配完成0 hr和48 hr的擴增曲線。表2展示Multiplex Probe qPCR Mix Plus U和廠家T在0 hr和48 hr的Ct值。可以看出,預裝配體系室溫放置48小時后Multiplex Probe qPCR Mix Plus U依然具有優(yōu)秀的擴增表現。
圖1: P2701-0hr
圖2: P2701-48hr
圖3: supplier T-0hr
圖4: supplier T-48hr
表2
Target | Ct Value-P2701 0 hr 48hr | Ct Value-supplier T 0 hr 48hr | ||
CY5 | 29.18 | 29.26 | 27.01 | 27.05 |
FAM | 33.05 | 33.09 | 33.15 | 36.28 |
ROX | 26.24 | 26.21 | 26.46 | 26.45 |
DSPath NGS Multiplex PCR Master Mix II
工作臺穩(wěn)定性測試
DSPath NGS Multiplex PCR Master Mix II不僅能滿足tNGS微量測序的需求,也能表現出優(yōu)良的工作臺穩(wěn)定性,滿足高通量測序大量樣品同時上機的需求,最大程度上減少加樣順序造成的差異。圖5-8分別展示了反應體系于室溫下放置0hr和48hr后的各項指標,可以看出表現基本一致,說明DSPath NGS Multiplex PCR Master Mix II可以滿足48小時工作臺穩(wěn)定性。
圖5: 擴增產量 圖6: 引物二聚體比例
圖7: 病原體物種檢出率 圖8: 目標reads檢出率